Abstract
Energy transfer phenomena, in which excited fluorophores transfer energy to neighbouring chromophores, are well characterised in photochemistry and have found a wide range of applications in analytical biochemistry. The transfer of energy from a donor to an acceptor group is only significant over distances of a few nm, so it can be used as a spectroscopic ruler and as a means of detecting molecular interactions and conformational changes. Such methods usually retain the great sensitivity and sample handling flexibility of conventional fluorescence techniques. As a result many assays involving enzymes, antibodies and nucleotides utilise energy transfer measurement principles. This article outlines these principles for the main types of energy transfer, and summarises some of their most important areas of application
چکیده
پدیده های انتقال انرژی، که در آن انتقال انرژی فلوئوروفورها تحریک شده به کروموفورهای مجاور، به خوبی در فوتوشیمی شناسایی شده و طیف گسترده ای از کاربردها را در بیوشیمی تحلیلی بدست آورده است. انتقال انرژی از یک گروه دهنده به یک گروه پذیرنده تنها در فاصله چند نانومتر قابل توجه است، بنابراین میتوان آن را به عنوان یک راًس اسپکتروسکوپی و به عنوان ابزاری برای تشخیص برهمکنشهای مولکولی و تغییرات کنفورماسیونی استفاده کرد. این روش معمولا حساسیت زیاد و انعطاف پذیری حمل نمونه روشهای فلورسانس معمولی را حفظ میکند. در نتیجه بسیاری از روش شامل آنزیم ها، آنتی بادی ها و نوکلئوتیدها از اصول اندازه گیری انتقال انرژی استفاده میکنند. این مقاله به تشریح این اصول برای انواع اصلی انتقال انرژی میپردازد و برخی از مهم ترین کاربردهای آنها را به طور خلاصه بیان میکند.
1-مقدمه
اهمیت طیف سنجی فلورسانس در تجزیه و تحلیل زیستی در سال های اخیر فوق العاده افزایش یافته است ]2،1[، که تا حد زیاد به لطف حساسیت بیش از حد این روش و سهولت آن میباشد که برای انواع مختلف قالبهای نمونه استفاده میشود. مشخصه دوم بدان معنی است که ردیابی فلورسانس برای بسیاری از روش های جداسازی، تجزیه و تحلیل فرایند و تکنیک های ویژه زیستی مناسب است. گزینش پذیری ارائه شده توسط اندازه گیری های فلورسانس نیز ارزشمند است. این امر نه تنها از تحریک متمایز و طیف فلورسانس و طول موجهای موجود برای هر فلوروفور مشتق میشود، بلکه از فرصتهای عمر زمانی ]3[ و اندازه گیری های قطبی ]4[ در دسترس است....