A single step extraction-cleanup procedure using porous membrane-protected micro-solid phase extraction (l-SPE) in conjunction with liquid chromatography–tandem mass spectrometry for the extraction and determination of aflatoxins (AFs) B1,B2,G1and G2from food was successfully developed. After the extraction, AFs were desorbed from thel-SPE device by ultrasonication using acetonitrile. The optimum extraction conditions were: sorbent material, C8; sorbent mass, 20 mg; extraction time, 90 min; stirring speed, 1000 rpm; sample volume, 10 mL; desorption solvent, acetonitrile; solvent volume, 350lL and ultrasonication period, 25 min without salt addition. Under the optimum conditions, enrichment factor of 11, 9, 9 and 10 for AFG2, AFG1, AFB2and AFB1, respectively were achieved. Good linearity and correlation coefficient was obtained over the concentration range of 0.4–50 ng g_1 (r2 0.9988–0.9999). Good recoveries for AFs ranging from 86.0–109% were obtained. The method was applied to 40 samples involving malt beverage (19) and canned coffee (21). No AFs were detected in the selected samples

 چکیده

فرایند استخراج-شستشو با استفاده از غشای متخلخل محافظت شده استخراج فاز ریز-جامد (µ-SPE) در ارتباط با کروماتوگرافی مایع جفت شده با طیف سنجی جرمی برای استخراج و تعیین آفلاتوکسین (AFs)B₁، B₂، G₁و G₂ از غذا با موفقیت توسعه یافته است. بعد از استخراج، AFs از دستگاه µ-SPE بوسیله اولتراسونیک با استونیتریل واجذب می­شود. شرایط بهینه استخراج بدین شرح است: ماده جاذب، 10 میلی­لیتر؛ جرم جاذب، 20 میلی­گرم؛ زمان استخراج، 90 دقیقه؛ سرعت بهم زدن محلول، 1000 دور بر دقیقه؛ حجم نمونه، 10 میلی­لیتر؛ حلال واجذبی، استونیتریل؛ حجم حلال، 350 میکرولیتر و زمان اولتراسونیک، 25 دقیقه بدون افزودن نمک می­باشد. تحت شرایط بهینه، فاکتور غنی ­سازی 11، 9، 9 و 10 بترتیب برای AFG₂، AFG₁، AFB₂ و AFB₁ بدست آمده است. ارتباط خطی و ضریب همبستگی خوبی در غلظت های بین 4/0-50 ng g^-1r²)9999/0- 9988/0( بدست آمده است. بازیافت خوبی برای AFs در محدوده 0/86 تا 109 % بدست آمده است. این روش برای 40 نمونه شامل نوشیدنی آبجو (19) و قهوه (21) بکار گرفته شده است. هیچ Afs در نمونه­ های انتخاب شده وجود نداشت.

1-مقدمه

میسوتوکسین­ ها، متابولیت های سمی و وزن مولکولی کوچک (MW~700)هستند که بوسیله گونه­ های قارچی نظیر Aspergillus (A.)، Fusarium و penicillum تولید می­شود و در محصولات کشاورزی در شرایط دمایی و رطوبت مختلف رشد می­یابد. میسوتوکسین­ ها به قبل از سال 1960 برمی­گردند زمانی­که یک شیوع بیماری X منجر به از بین رفتن 100000 بوقلمون شد. بعدا علت این مرگ و میر به مصرف بادام زمینی نسبت داده شد که باAspergillusflavus و آفلاتوکسین­ ها (AFs) آلوده شده بودند(Beltran,Ibanz, Sancho, & Hernandez, 2009; Turner, Subrahmanyam, & Piletsky,2009).اگرچه بیشتر از 300 میسوتوکسین شناخته شده است که تنها حدود 20 میسوتوکسین بطور مکرر در غذا و علوفه حیوانات وجود دارد. مابین همه میسوتوکسین­ ها، AFs سمیت بالایی دارد که از ochratoxin A (OTA) پیروی می­کند (Beltrán et al., 2011). مابین 20 AFs که شناخته شده است تنها آفلاتوکسین ای B₁(AFB₁)،B₂(AFB₂)، G₁(AFG₁) و G₂(AFG₂) می­توانند محصولات کشاورزی را در مناطق گرمسیری آلوده کنند (Lutfullah&Hussain, 2012). اثرات سرطان زایی و سمی بودن AFs منجر به این شد که آژانس بین المللی برای تحقیق بر روی سرطان (IARC)AFB₁ را بعنوان سرطان زای گروه 1 دسته بندی کند درحالی که AFs های دیگر و OTA بعنوان سرطان زای ممکن دسته بندی شده است...